bmgrp BI-20433說明書

人骨膜素酶聯(lián)免疫吸附測定| BI-20433

人骨膜素ELISA的亮點(diǎn)：

• 可檢測所有已知Periostin亞型的檢測
• 根據(jù)FDA / ICH / EMEA指南進(jìn)行了廣泛驗(yàn)證
• 包括7種基于人血清的標(biāo)準(zhǔn)品和2個(gè)對照

下一個(gè)

• 1個(gè)
• 2
• 3

分析特征

• 方法

  夾心ELISA，HRP / TMB，12×8孔可分離試紙

• 樣品類型

  血清，血漿（EDTA，檸檬酸鹽，肝素），尿液，細(xì)胞培養(yǎng)上清液

• 樣品量

  10 µl /孔

• 測定時(shí)間

  2小時(shí)/ 2小時(shí)/ 1小時(shí)/ 30分鐘

• 靈敏度

  20 pmol / l（= 1800 pg / ml）

• 標(biāo)準(zhǔn)范圍

  0 – 4,000 pmol / l（= 0 – 360 000 pg / ml）

• 轉(zhuǎn)換系數(shù)

  1 pmol / l = 91 pg / ml（分子量：91 kDa）

• 特異性

  內(nèi)源性和重組人骨膜素；所有已知的等位基因。

•  

  中間運(yùn)行（n = 10）：≤6％CV

  批量分析（n = 5）：≤3％CV

• 監(jiān)管狀況

  僅供研究使用。

• 交叉反應(yīng)

  由于人Periostin和其他物種的Periostin之間具有高度的序列同源性，因此與食蟹猴，狗和貓Periostin有潛在的交叉反應(yīng)性。

• 采用

  僅供研究使用。

• 驗(yàn)證數(shù)據(jù)

  請參閱驗(yàn)證數(shù)據(jù)選項(xiàng)卡，以了解：精度，準(zhǔn)確性，稀釋線性，健康供體的值等

產(chǎn)品詳情

• 產(chǎn)品總覽
• 分析原理

• 典型標(biāo)準(zhǔn)曲線
• 套件組件

人Periostin ELISA產(chǎn)品概述

人Periostin ELISA試劑盒是一個(gè)5.5小時(shí)的96孔三明治ELISA，用于定量測定人血清和血漿中的Periostin。骨膜素測定法采用基于人血清的標(biāo)準(zhǔn)品，以確保測量生物學(xué)上可靠的數(shù)據(jù)。

人Periostin試劑盒使用具有特征性結(jié)合動(dòng)力學(xué)的高度純化的，表位定位的抗體。

人骨膜素ELISA測定原理

Periostin ELISA試劑盒是一種夾心酶免疫測定法，用于定量測定人血清和血漿樣品中的Periostin。

下圖說明了Periostin ELISA的原理：

捕獲抗體：小鼠抗人Periostin單克隆抗體
檢測抗體：多克隆山羊抗人Periostin抗體，生物素標(biāo)記
目標(biāo)抗原：人Periostin

一步，將預(yù)先稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品/對照品/樣品和生物素化的多克隆山羊抗人Periostin抗體移液到微量滴定條的孔中，并用小鼠單克隆抗人Periostin抗體進(jìn)行預(yù)包被。標(biāo)準(zhǔn)/對照/樣品中存在的骨膜素與孔中的預(yù)包被抗體結(jié)合，并與檢測抗體形成三明治。在洗滌步驟中，去除所有非特異性未結(jié)合的材料。在第二步中，將結(jié)合物（抗生蛋白鏈菌素-HRP）移入孔中，并與檢測抗體反應(yīng)。在另一個(gè)洗滌步驟之后，將底物（TMB，四甲基聯(lián)苯胺）吸移到孔中。底物的酶催化顏色變化與樣品中存在的骨膜素量成正比。使用標(biāo)準(zhǔn)的微量滴定板讀數(shù)器可以檢測到這種顏色變化。使用從標(biāo)準(zhǔn)品獲得的值，生成吸光度（光密度，在450 nm處的OD）與標(biāo)準(zhǔn)濃度的劑量響應(yīng)曲線。直接從劑量反應(yīng)曲線確定樣品中人骨膜素的濃度。

人骨膜素ELISA典型標(biāo)準(zhǔn)曲線

下圖顯示了人骨膜素ELISA的典型標(biāo)準(zhǔn)曲線。免疫測定針對重組人Periostin肽進(jìn)行了校準(zhǔn)：

人Periostin ELISA試劑盒組件

儲(chǔ)存說明： 人Periostin ELISA試劑盒中的所有試劑在4°C（2-8°C）下穩(wěn)定，直到每種試劑標(biāo)簽上注明的有效期。

使用說明

• 樣品收集與儲(chǔ)存

• 試劑準(zhǔn)備

• 樣品制備

• 檢測方案

• 計(jì)算結(jié)果

樣品收集與儲(chǔ)存

血清，EDTA血漿，肝素血漿，檸檬酸鹽血漿，尿液和細(xì)胞培養(yǎng)上清液適用于此骨膜素測定。研究期間請勿更改樣品類型。我們建議對所有樣品，標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品進(jìn)行重復(fù)測量。列出的樣品收集和儲(chǔ)存條件旨在作為一般準(zhǔn)則。

血清和血漿

使用EDTA，肝素或檸檬酸鹽作為抗凝劑，在標(biāo)準(zhǔn)化血清分離管（SST）或標(biāo)準(zhǔn)化血液采集管中收集靜脈血樣。對于血清樣品，讓樣品在室溫下凝結(jié)30分鐘。根據(jù)試管制造商的使用說明離心分離。立即測定采集的樣品，或等分試樣并保存在-25°C或更低的溫度下。脂血或溶血的樣品可能會(huì)產(chǎn)生錯(cuò)誤的結(jié)果。樣品在四個(gè)凍融循環(huán)中保持穩(wěn)定。解凍后的樣品應(yīng)盡快測定。

尿

注意：根據(jù)FDA / ICH / EMEA指南進(jìn)行的用于測量尿液樣品中骨膜素的實(shí)驗(yàn)未經(jīng)過*驗(yàn)證。但是，我們的性能檢查表明可以使用此ELISA測定尿液樣品。

無菌收集當(dāng)天的一批尿（中游），直接排入無菌容器中。離心除去顆粒物，立即分析或等分并保存在-25°C或更低的溫度下。樣品解凍不要超過四次。解凍后的樣品應(yīng)盡快測定。

細(xì)胞培養(yǎng)上清液

注意：根據(jù)FDA / ICH / EMEA指南進(jìn)行的測量Periostin細(xì)胞培養(yǎng)上清液樣品的實(shí)驗(yàn)未經(jīng)過全面驗(yàn)證。但是，我們的性能檢查表明可以使用此ELISA測定細(xì)胞培養(yǎng)上清液樣品。 

通過離心去除顆粒，立即進(jìn)行分析或等分試樣，并將樣品存儲(chǔ)在
-25°C或更低的溫度下。樣品解凍不要超過四次。解凍后的樣品應(yīng)盡快測定。

試劑準(zhǔn)備

洗滌緩沖液

稀釋的WASHBUF在4°C（2-8°C）下可以穩(wěn)定長達(dá)一個(gè)月。

標(biāo)準(zhǔn)與控制

重構(gòu)的STD和CTRL在-25°C或更低的溫度下穩(wěn)定，直到標(biāo)簽上標(biāo)明的失效日期為止。STD和CTRL可以經(jīng)歷一個(gè)凍融循環(huán)。

在測定之前，必須用ASYBUF（測定緩沖液）將STD / CTRLs稀釋1 + 50，例如10 µl STD / CTRL + 500 µl ASYBUF 。

注意：每孔需要150 µl預(yù)稀釋的STD / CTR1。

樣品制備

將樣品置于室溫并輕輕混合樣品，以確保樣品均勻。我們建議對所有樣品進(jìn)行重復(fù)測量。

測定前，血清和血漿樣品必須用ASYBUF（測定緩沖液）稀釋1 + 50，例如10 µl樣品+ 500 µl ASYBUF。OD仍超過標(biāo)準(zhǔn)范圍高點(diǎn)的1 + 50稀釋血清和血漿樣品可以用ASYBUF進(jìn)一步稀釋。

注意：每孔需要150 µl的預(yù)稀釋樣品。

使用未稀釋的尿液和細(xì)胞培養(yǎng)上清液樣品。OD超出標(biāo)準(zhǔn)范圍高點(diǎn)的尿液和細(xì)胞培養(yǎng)上清液樣品可用ASYBUF（測定緩沖液）稀釋1 + 50。

人骨膜素ELISA測定方案

在開始測定之前，請閱讀整個(gè)方案。

計(jì)算結(jié)果

使用能夠生成四參數(shù)對數(shù)（4-PL）擬合的市售軟件從標(biāo)準(zhǔn)品的吸光度讀數(shù)構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線。或者，將標(biāo)樣在x軸上的濃度相對于每種標(biāo)樣在y軸上的平均吸光度作圖，并通過圖中的點(diǎn)繪制佳擬合曲線。除4-PL以外的曲線擬合算法尚未得到驗(yàn)證，用戶需要對其進(jìn)行評估。

從標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品濃度。如果需要，可以通過應(yīng)用轉(zhuǎn)換因子（1 pg / ml = 0.011 pmol / l（MW：91 kDa））將pmol / l轉(zhuǎn)換為pg / ml。計(jì)算樣品的終濃度時(shí)，必須考慮1 + 50以上的樣品稀釋度。對于未稀釋的樣品，將值除以50，以獲得終樣品濃度。

套件隨附的質(zhì)量控制（QC）協(xié)議顯示了生產(chǎn)日期每個(gè)套件批次的終版本QC結(jié)果。客戶獲得的OD數(shù)據(jù)可能會(huì)受到各種影響，包括在整個(gè)保質(zhì)期內(nèi)信號強(qiáng)度正常下降的影響。但是，只要濃度高的標(biāo)準(zhǔn)品的OD為1.50或更高，并且CTRL的值在目標(biāo)范圍內(nèi)（參見標(biāo)簽），這就不會(huì)影響結(jié)果的有效性。

背景與治療領(lǐng)域

骨膜素蛋白

骨膜素（OSF-2）分泌為91 kDa的同型二聚體可溶性細(xì)胞外基質(zhì)蛋白，在富含膠原蛋白的纖維結(jié)締組織中表達(dá)。Periostin至少有7種亞型，是由其他剪接引起的（http://www.uniprot。。ｏｒｇ/uniprot/Q15063）。

骨膜素功能

骨膜素參與成骨細(xì)胞的募集，附著和擴(kuò)散。它與癌癥中的上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化以及在發(fā)展中的心臟中的間質(zhì)分化有關(guān)。骨膜素在骨科，組織修復(fù)，腫瘤科，心血管和呼吸系統(tǒng)疾病以及各種炎癥環(huán)境中具有功能。

• 代謝性疾病

  糖尿病性視網(wǎng)膜病（Ding等人，2018）

• 腎臟科

  腎臟纖維化（An等，2018; Hwang等，2017; Mael-Ainin等，2014; Sen等，2011）

  多囊腎（Raman等人，2018; Wallace等人，2014）

  高血壓腎病（Guerrot et al。，2012）

  腎臟損傷（Satirapoj等人，2015、2014、2012）

  IgA腎病（Hwang等，2016; Satirapoj等，2014）

• 腫瘤科

  多發(fā)性骨髓瘤（Terpos et al。，2016）

  成釉細(xì)胞瘤（Kang等人，2018）

  卵巢癌（Ryner等人，2015; Sung等人，2016; Tang等人，2018）

  甲狀腺乳頭狀癌（Giusca et al。，2017）

  頭頸癌（Liu et al。，2018）

  乳腺癌（Kim等，2017; Lambert等，2016; Nuzzo等，2016; Ratajczak-Wielgomas等，2017）

  肺癌（Che等，2017; Zhang等，2017）

  骨肉瘤（Hu et al。，2016）

  胃癌（Liu et al。，2016）

  膀胱癌（Silvers et al。，2016）

  前列腺癌（Tian等，2015）

• 骨科

  骨質(zhì)疏松癥（Kim等人，2015; Rousseau等人，2014; Varughese等人，2018; Yan等人，2017）

  佩吉特氏病（Polyzos et al。，2017）

  骨關(guān)節(jié)炎（Chijimatsu等，2015; Honsawek等，2015b; Rousseau等，2014; Tajika等，2017）

  類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（Kerschan-Schindl等，2018; Sakellariou等，2015）

  強(qiáng)直性脊柱炎（Solmaz u.a.，2018）

• 其他

  傷口愈合

  流產(chǎn)（Freis等人，2017）

  皮膚疾病（Murota等，2017; Sung等，2017）

  肝臟僵硬（Honsawek等，2015）

• 冠心病

  哮喘（Carpagnano等人，2018;Górska等人，2016; Hoshino等人，2016; Inoue等人，2016; Kim等人，2014; Lee等人，2018; Matsusaka等人，2015 ； O'Dwyer和Moore，2017； Song等，2015）

  過敏（富士島等人，2016;伊豆原等人，2017）

  肺纖維化（Ohta等，2017）

  支氣管肺發(fā)育不良（Ahlfeld et al。，2016）

文學(xué)

Periostin通過p38 MAPK途徑在急性腎臟損傷后誘導(dǎo)腎臟纖維化。
An，JN，Yang，SH，Kim，YC，Hwang，JH，Park，JY，Kim，DK，Kim，JH，Kim，DW，Hur，DG，Oh，YK，Lim，CS，Kim，YS，Lee， JP，2018年。上午。J.生理學(xué)。腎臟生理學(xué)。
PMID：30539653

尋找患有嚴(yán)重哮喘的氣管骨膜素：對2型內(nèi)異型聚類有用嗎？
Carpagnano，GE，Scioscia，G.，Lacedonia，D.，Soccio，P.，Lepore，G.，Saetta，M.，F(xiàn)oschino Barbaro，MP，Barnes，PJ，2018。胸部154，1083–1090。
PMID：30336944

血清骨膜素濃度升高與2型糖尿病患者的糖尿病性視網(wǎng)膜病變有關(guān)。
丁Y，葛強(qiáng)，曲海峰，馮Z.，龍杰。，魏強(qiáng)。，周Q.，吳，R.，姚L.，鄧H.， 2018.內(nèi)分泌 投資。41，937–945。
PMID：29349642

在成釉細(xì)胞瘤發(fā)病機(jī)理中Periostin表達(dá)上調(diào)。
Kang，Y.，Liu，J.，Zhang，Y.，Sun，Y.，Wang，J.，Huang，B.，Zhong，M.，2018.《病理科學(xué)》。Res。實(shí)踐 214，1959年-1965年。
PMID：30196986

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎緩解：肌生長抑制素降低，骨膜素血清水平升高。
Kerschan-Schindl，K.，Ebenbichler，G.，F(xiàn)öeger-Samwald，U.，Leiss，H.，Gesslbauer，C.，Herceg，M.，Stummvoll，G.，Marculescu，R.，Crevenna，R.，Pietschmann ，P.，2018年。維也納。克林 Wochenschr。
PMID：30171335

血清骨膜素水平：甲苯二異氰酸酯誘導(dǎo)的職業(yè)性哮喘的潛在血清學(xué)標(biāo)志物。
Lee，JH，Kim，SH，Choi，Y.，Trinh，HKT，Yang，EM，Ban，GY，Shin，YS，Ye，YM，Izuhara，K.，Park，HS，2018.延世醫(yī)學(xué)。J. 59，1214–1221。
PMID：30450856；PMCID：PMC6240562

骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞通過雷帕霉素介導(dǎo)的Periostin介導(dǎo)的磷酸肌醇3-激酶/ Akt /哺乳動(dòng)物靶標(biāo)促進(jìn)頭頸癌的進(jìn)展。
Liu，C.，F(xiàn)eng，X.，Wang，B.，Wang，X.，Wang，C.，Yu，M.，Cao，G.，Wang，H.，2018.癌癥科學(xué)。109，688–698。
PMID：29284199；PMCID：PMC5834805

收集管中的骨膜素過表達(dá)會(huì)加速多囊腎疾病中的腎囊腫生長和纖維化。
拉曼，A.，帕內(nèi)爾，SC，張，Y.，Reif，GA，戴，Y.，卡納，A.，丹尼爾，E.，白色，C. J.生理學(xué)。腎臟生理學(xué)。
PMID：30332313

卵巢癌細(xì)胞與巨噬細(xì)胞通過骨膜素的相互干擾促進(jìn)了巨噬細(xì)胞的募集。
Tang M.，Liu，B.，Bu，X.，Zhao，P.，2018.癌癥科學(xué)。109，1309–1318。
PMID：29527764; PMCID：PMC5980394

小骨折，長骨折和關(guān)節(jié)置換后的血清骨膜素水平：一項(xiàng)觀察性研究。
Varughese，R.，Semprini，R.，Munro，C.，F(xiàn)ingleton，J.，Holweg，C.，Weatherall，M.，Beasley，R.，Braithwaite，I.，2018.過敏性哮喘臨床。免疫 關(guān) J.可以 Soc。過敏臨床。免疫 14. 
PMID：30065761；PMCID：PMC6060508

慢病毒介導(dǎo)的Periostin沉默通過整聯(lián)蛋白信號通路對肺癌微環(huán)境和骨轉(zhuǎn)移的影響。
車潔。沉文治。鄧穎。戴.H。廖雅文。袁新利。張平.2017。科學(xué) 182，10-21。
PMID：28601389

流產(chǎn)婦女在懷孕初期的血清骨膜素水平顯著改變。
Freis，A.，Schlegel，J.，Kuon，RJ，Doster，A.，Jauckus，J.，Strowitzki，T.，Germeyer，A.，2017。生物學(xué) 內(nèi)分泌醇。RBE 15. 
PMID：29096644; PMCID：PMC5667517

乳頭狀甲狀腺癌在不同組織學(xué)變體中異質(zhì)骨膜素的表達(dá)。
Giusca，SE，Amalinei，C.，Lozneanu，L.，Ciobanu Apostol，D.，Andriescu，EC，Scripcariu，A.，Balan，R.，Avadanei，ER，C?runtu，I.-D.，2017. BioMed Res 。詮釋 2017，8701386. 
PMID：29435461; PMCID：PMC5757104

實(shí)驗(yàn)性抑制骨膜素可減輕腎臟纖維化。
Hwang，JH，Yang，SH，Kim，YC，Kim，JH，An，JN，Moon，KC，Oh，YK，Park，JY，Kim，DK，Kim，YS，Lim，CS，Lee，JP，2017。上午。J. Nephrol。46，501–517。
PMID：29268247

骨膜素在炎癥和過敏。
Izuhara，K.，Nunomura，S.，Nanri，Y.，Ogawa，M.，Ono，J.，Mitamura，Y.，Yoshihara，T.，2017年。細(xì)胞。大聲笑 生命科學(xué) CMLS 74，4293–4303。
PMID：28887633

上皮骨膜素表達(dá)與浸潤性乳腺癌患者的不良生存相關(guān)。
Kim，G.-E.，Lee，JS，Park，MH，Yoon，JH，2017年。PloSOne 12，e0187635。
PMID：29161296；PMCID：PMC5697858

骨膜素在皮膚疾病的發(fā)病機(jī)理中。
Murota，H.，Lingli，Y.，片山，I.，2017.細(xì)胞。大聲笑 生命科學(xué) CMLS 74，4321–4328。
PMID：28916993

骨膜素在肺纖維化和氣道重塑中的作用。
O'Dwyer，DN，Moore，BB，2017年。Cell。大聲笑 生命科學(xué) CMLS 74，4305–4314。
PMID：28918442; PMCID：PMC5659879

單體骨膜素作為特發(fā)性肺纖維化的生物標(biāo)志物的有用性。
大田S.，岡本M.，藤本K.，坂本N.，高橋K.，山本H.，Ku島H.，石井H.，赤坂K.，小野J. A.Kamei，A.Azuma，Y.Matsumoto，H.Yamaguchi，Y.Aihara，M.，Johkoh，T.，Kawaguchi.A。，Ichiki，M.，Sagara，H.，Kadota，J.- I.，Hanaoka，M.，Hayashi，S.-I.，Kohno，S.，Hoshino，T.，Izuhara，K.，肺纖維化患者診斷開發(fā)協(xié)會(huì)（CoDD-PF），2017年。 12，e0174547。
PMID：28355256；PMCID：PMC5371347

佩吉特氏病少年時(shí)期的骨膜素和硬化素水平。
Polyzos，SA，Makras，P.，Anastasilakis，AD，Mintziori，G.，Kita，M.，Papatheodorou，A.，Kokkoris，P.，Terpos，E.，2017。案例礦工。骨代謝。關(guān) J.Ital。Soc。骨質(zhì)疏松癥。礦工。代謝 ke。Dis。14，269-271。
PMID：29263750；PMCID：PMC5726226

骨膜素在乳腺癌細(xì)胞中的表達(dá)。
Ratajczak-Wielgomas，K.，Grzegrzolka，J.，Piotrowska，A.，Matkowski，R.，Wojnar，A.，Rys，J.，Ugorski，M.，Dziegiel，P.，2017。J.Oncol。51，1300–1310。
PMID：28902360

骨膜素水平與兒童特應(yīng)性皮炎的嚴(yán)重程度和長期性相關(guān)。
Sung，M.，Lee，KS，Ha，EG，Lee，SJ，Kim，MA，Lee，SW，Jee，HM，Sheen，YH，Jung，YH，Han，MY，2017。兒童醫(yī)學(xué)。過敏免疫。關(guān) 出版 歐元。Soc。小兒科 過敏免疫。28，543–550。
PMID：28631851

骨膜素對膝骨關(guān)節(jié)炎滑膜細(xì)胞的影響。
Y. Tajika，Moue，T.，Ishikawa，S.，Asano，K.，Okumo，T.，Takagi，H.，Hisamitsu，T.，2017年。Vivo Athens Greece 31，69-77。
PMID：28064223; PMCID：PMC5354150

在中國老年婦女的髖部骨折早期，循環(huán)的骨膜素水平與骨密度損失和愈合進(jìn)展有關(guān)。
嚴(yán)潔。骨質(zhì)疏松癥。詮釋 J.Establ。結(jié)果合作社。歐元。找到了。骨質(zhì)疏松癥。Natl。骨質(zhì)疏松癥。找到了。美國28，2335–2341。
PMID：28382553

血清骨膜素對接受化療的晚期非小細(xì)胞肺癌患者的預(yù)測和預(yù)后價(jià)值。
Zhang，Y.，Yuan D.，Yao，Y.，Sun，W.，Shi，Y.，Su，X.，2017.腫瘤生物學(xué)。J. Soc。腫瘤發(fā)展生物學(xué)。中 39，1010428317698367. 
PMID：28459197

Ahlfeld，SK，Davis，SD，Kelley，KJ，Poindexter，BB，2016年。J.呼吸 暴擊 護(hù)理醫(yī)學(xué)。194，1430–1433。
PMID：27905846；PMCID：PMC5148145

測量眼淚骨膜素對眼部過敏性疾病的診斷和管理的有用性。
藤島H.，岡田N.，松本K.，深川K.，五十嵐A.，松田A.，小野J.，大田S.，穆凱H.，吉川M. Izuhara，K.，2016年。《過敏臨床》。免疫 138，459-467.e2。
PMID：26964692

哮喘和慢性阻塞性肺疾病患者不同呼吸樣品中骨膜素表達(dá)的比較研究。
Kórska，M.Maskey-Warz?chowska，Nejman-Gryz，P.Korczyński，P.Prochorec-Sobieszek，M.，Krenke，R.，2016 拱。中 編織。126，124–137。
PMID：26895432

初治類固醇的哮喘患者氣道壁厚度與血清骨膜素的關(guān)系。
Hoshino，M.，Ohtawa，J.，Akitsu，K.，2016。過敏性哮喘研究。37，225–230。
PMID：27178891

骨膜蛋白的高表達(dá)與腫瘤血管生成和骨肉瘤的不良預(yù)后密切相關(guān)。
Hu F，Shang，X.-F.，Wang，W.，Jiang，W.，F(xiàn)ang，C.，Tan，D.，Zhou，H.-C.，2016。J. Exp。Pathol。97、86–92。
PMID：27028305；PMCID：PMC4840243

尿液骨膜排泄可預(yù)測IgA腎病的腎臟結(jié)局。
Hwang，JH，Lee，JP，Kim，CT，Yang，SH，Kim，JH，An，JN，Moon，KC，Lee，H.，Oh，YK，Joo，KW，Kim，DK，Kim，YS，Lim ，CS，2016年。J. Nephrol。44，481–492。
PMID：27802442

骨膜素作為診斷小兒哮喘的生物標(biāo)志物。
井上（T.），明石（K.Akashi），渡邊（M.），池田（Y.），池田（Y.），沖繩（S.），本木（T.），鈴木（R.），薩加拉（S.），北河，柳田（N.），佐藤（S.）， Ebisawa，M.，Ohta，S.，Ono，J.，Izuhara，K.，Katsunuma，T.，2016年。Pediatr。過敏免疫。關(guān) 出版 歐元。Soc。小兒科 過敏免疫。27，521–526。
PMID：27062336

腫瘤細(xì)胞衍生的骨膜素調(diào)節(jié)維持乳腺癌干細(xì)胞的細(xì)胞因子。
Lambert，AW，Wong，CK，Ozturk，S.，Papageorgis，P.，Raghunathan，R.，Alekseyev，Y.，Gower，AC，Reinhard，BM，Abdolmaleky，HM，Thiagalingam，S.，2016。癌癥研究。MCR 14，103-113。
PMID：26507575；PMCID：PMC4715959

異丙腎上腺素誘導(dǎo)胃癌中骨膜素的表達(dá)。
劉國新，習(xí)慧卿，孫新耀，耿祖杰，楊世偉，陸耀杰，魏， B.，Chen L.，2016.延世醫(yī)學(xué)。J. 57，557–564。
PMID：26996552；PMCID：PMC4800342

基質(zhì)和上皮骨膜蛋白表達(dá)在人類乳腺癌中的預(yù)后價(jià)值：與臨床病理特征和死亡率結(jié)果相關(guān)。
Nuzzo，PV，Rubagotti，A.，Zinoli，L.，Salvi，S.，Boccardo，S.，Boccardo，F(xiàn).，2016。BMC癌癥
16，95。PMID：26872609; PMCID：PMC4752779

鑒定胞外囊泡性骨膜素是肌肉浸潤性膀胱癌的特征。
Silvers，CR，Liu，Y.-R.，Wu，C.-H.，Miyamoto，H.，Messing，EM，Lee，Y.-F.，2016。Oncotarget7，23335–23345。
PMID：26981774；PMCID：PMC5029630

腫瘤微環(huán)境中的骨膜素與上皮性卵巢癌的不良預(yù)后和鉑耐藥相關(guān)。
Sung，P.-L.，Jan，Y.-H.，Lin，S.-C.，Huang，C.-C.，Lin，H.，Wen，K.-C.，Chao，K.- C.，Lai，C.-R.，Wang，P.-H.，Chuang-M。，Wu，H.-H.，Twu，N.-F.，Yen，M.-S. ，H.iao，M.，Huang，C.-YF，2016。Oncotarget7，4036-4047。
PMID：26716408; PMCID：PMC4826188

新診斷為癥狀性多發(fā)性骨髓瘤的患者，高水平的骨膜素與骨折率增加，MRI彌散性檢查，骨重塑異常和疾病進(jìn)展階段有關(guān)。
E. Terpos，D。Christoulas，E。Kastritis，Bagratuni，T.，Gavriatopoulou，M.，Roussou，M.，Papatheodorou，A.，Eleutherakis-Papaiakovou，E.，Kanellias，N.，Liakou，C ，Panagiotidis，I.，Migkou，M.，Kokkoris，P.，Moulopoulos，LA，Dimopoulos，MA，2016年。《血液癌癥雜志》 6，e482。
PMID：27716740; PMCID：PMC5098262

骨膜素在人骨關(guān)節(jié)炎軟骨中的表達(dá)及其病理作用。
R. Chijimatsu，R。Kunugiza，Y。，谷山，Y.，Nakamura，N。，富田，T。，吉川，H.，2015年。BMC肌肉骨骼。不和諧 16，215. 
PMID：26289167; PMCID：PMC4545863

血清骨膜素升高與肝臟僵硬和膽道閉鎖的臨床預(yù)后有關(guān)。
Honsawek，S.，Udomsinprasert，W.，Vejchapipat，P.，Chongsrisawat，V.，Phavichitr，N.，Poovorawan，Y.，2015a。生物標(biāo)記。生化。印度 世博會(huì)。反應(yīng)敏感性化學(xué)。20，157–161。
PMID：25980529

血漿和滑液骨膜素與影像學(xué)膝關(guān)節(jié)骨關(guān)節(jié)炎的關(guān)系：橫斷面研究。
Honsawek，S.，Wilairatana，V.，Udomsinprasert，W.，Sinlapavilawan，P.，Jirathanathornnukul，N.，2015b。Jt。骨頭脊椎牧師。82，352–355。
PMID：25881760

血漿骨膜素與絕經(jīng)后婦女的非椎骨骨折明顯相關(guān)，而與椎骨骨折無關(guān)：臨床證據(jù)表明，骨膜素對骨骼部位的影響不同。Kim，B.-J.，Rhee，Y.，Kim，CH，Baek，KH，Min，Y.-K.，Kim，D.-Y.，Ahn，SH，Kim，H.，Lee，SH， Lee，S.-Y.，Kang，M.-I.，Koh，J.-M.，2015年。骨81，435–441。
PMID：26297442

哮喘的表型與高血清骨膜素水平有關(guān)。
松阪（Matsusaka，M.），Ka田（Kabata），H。福永（K.Fukunaga），鈴木（Y.），正木（K。），K。 Sayama，K.，Koh，H.，Nakamura，M.，梅田，A.，Ono，J.，Ohta，S.，Izuhara，K.，Asano，K.，Betsuyaku，T.，2015。Allergol。詮釋 關(guān) J.Jpn。Soc。Allergol。64，175–180。
PMID：25838094

骨膜素和反應(yīng)性基質(zhì)的上調(diào)與原發(fā)化學(xué)耐藥性相關(guān)，并預(yù)測上皮性卵巢癌的臨床結(jié)果。
Ryner，L.，Guan，Y.，F(xiàn)irestein，R.，Xiao，Y.，Choi，Y.，Rabe，C.，Lu，S.，F(xiàn)uentes，E.，Huw，L.-Y.，Lackner， MR，F(xiàn)u，L.，Amler，LC，Bais，C.，Wang Y，2015.臨床。癌癥研究。關(guān) J.上午 副會(huì)長 癌癥研究。21，2941–2951。
PMID：25838397

AS患者中的骨膜素循環(huán)水平：與臨床和影像學(xué)變量，炎癥標(biāo)志物和參與骨形成的分子有關(guān)。
Sakellariou，GT，Anastasilakis，AD，Bisbinas，I.，Oikonomou，D.，Gerou，S.，Polyzos，SA，Sayegh，F(xiàn)E，2015年。Oxf。Engl。54，908–914。
PMID：25349442

骨膜素是2型糖尿病腎損傷的組織和尿液生物標(biāo)志物。
B. Satirapoj，S。Tassanasorn，M。Charoenpitakchai，M.，Supasyndh，O.，2015年。PloSOne 10，e0124055。
PMID：25884625; PMCID：PMC4401767

哮喘兒童的血清骨膜素水平與氣道對甲乙膽堿和甘露醇的反應(yīng)過度有關(guān)。
Song，J.-S.，You，J.-S.，Jeong，S.-I.，Yang，S.，Hwang，I.-T.，Im，Y.-G.，Baek，H.- S.，Kim，H.-Y.，Suh，D.-I.，Lee，H.-B.，Izuhara，K.，2015年。過敏70，674-681。
PMID：25703927

基質(zhì)中骨膜素的過度表達(dá)與侵略性前列腺癌呈正相關(guān)。
田Y，崔春秋，李，QK，拉瑪帕納，F(xiàn)B，陳X.，金，SR，Veltri，R.，嘉，D.，張，Z.，默拉科拉，D.，張H. ，2015年。PloSOne 10，e0121502。
PMID：25781169; PMCID：PMC4362940

血清骨膜素與阿司匹林加重的呼吸系統(tǒng)疾病相關(guān)。
Kim，M.-A.，Izuhara，K.，Ohta，S.，Ono，J.，Yoon，MK，Ban，GY，Yoo，H.-S.，Shin，YS，Ye，Y.-M. ，Nahm，D.-H.，Park，H.-S.，2014年。過敏性哮喘免疫。關(guān) 出版 上午。Coll。過敏性哮喘免疫。113、314-320。
PMID：25037608

抑制骨膜蛋白表達(dá)可防止腎臟炎癥和纖維化的發(fā)展。
Mael-Ainin，M.，Abed，A.，Conway，SJ，Dussaule，J.-C.，Chatziantoniou，C.，2014。Soc。腎上腺素。25，1724-1736年。
PMID：24578131

血清骨膜素與絕經(jīng)后婦女的骨折風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)：OFELY研究的7年前瞻性分析。
盧梭，JC，Sornay-Rendu，E.，Bertholon，C.，Chapurlat，R.，Ganero，P.，2014年。J。Clin。內(nèi)分泌醇。代謝 99，2533–2539。
PMID：24628551

尿骨膜素作為慢性同種異體移植腎病中腎損傷的生物標(biāo)志物。
Satirapoj，B.，Witoon，R.，Ruangkanchanasetr，P.，Wantanasiri，P.，Charoenpitakchai，M.，Choovichian，P.，2014。移植。進(jìn)程 46，135–140。

骨膜素可促進(jìn)多囊腎疾病中的腎囊腫生長和間質(zhì)纖維化。
*，DP，白，C.，Savinkova，L.，Nivens，E.，Reif，GA，Pinto，CS，Raman，A.，Parnell，SC，Conway，SJ，F(xiàn)ields，TA，2014年。85，845–854。
PMID：24284511

確定骨膜素是高血壓腎病進(jìn)展/逆轉(zhuǎn)的關(guān)鍵標(biāo)志。
Guerrot，D.，Dussaule，J.-C.，Mael-Ainin，M.，Xu-Dubois，Y.-C.，Rondeau，E.，Chatziantoniou，C.，Placier，S.，2012。PloSOne 7 ，e31974。
PMID：22403621；PMCID：PMC3293874

骨膜素：進(jìn)行性腎損傷的新組織和尿液生物標(biāo)志物在腎小管細(xì)胞中誘導(dǎo)協(xié)調(diào)的間充質(zhì)表型。
Satirapoj，B.，Wang，Y.，Chamberlin，MP，Dai，T.，LaPage，J.，Phillips，L.，Nast，CC，Adler，SG，2012。撥號。移植。關(guān) 出版 歐元。撥號。運(yùn)輸 副會(huì)長 - 歐元。仁 副會(huì)長 27，2702–2711。
PMID：22167593；PMCID：PMC3471549

骨膜素在腎小球損傷中被誘導(dǎo)并且在間質(zhì)性腎纖維化中從頭表達(dá)。
Sen，K.，Lindenmeyer，MT，Gaspert，A.，Eichinger，F(xiàn).，Neusser，MA，Kretzler，M.，Segerer，S.，Cohen，CD，2011。J.Pathol。179，1756–1767。
PMID：21854746

驗(yàn)證數(shù)據(jù)

• 校準(zhǔn)

• 檢測限和靈敏度

• 準(zhǔn)確性
• 稀釋線性度和平行度

• 特異性

• 交叉反應(yīng)

• 樣品穩(wěn)定性

• 樣本值

• 矩陣比較

所有Biomedica ELISA均根據(jù)FDA / ICH / EMEA指南進(jìn)行了驗(yàn)證。有關(guān)我們的驗(yàn)證準(zhǔn)則的更多信息，請參閱我們的質(zhì)量頁面以及已發(fā)布的驗(yàn)證準(zhǔn)則和文獻(xiàn)。

顯示驗(yàn)證文獻(xiàn)

校準(zhǔn)

針對重組人Periostin肽對人Periostin免疫測定進(jìn)行了校準(zhǔn)。

人骨膜素ELISA檢測下限和靈敏度

為了確定人Periostin ELISA的敏感性，進(jìn)行了測量檢測下限（LOD）和定量下限（LLOQ）的實(shí)驗(yàn)。

LOD（也稱為檢測極限）是可以在背景信號上方（即沒有Periostin的情況下測量的信號）高于99％的置信度的低點(diǎn)。將其定義為不含Periostin的樣品（三個(gè)獨(dú)立的測量值）的平均反向計(jì)算濃度加上測量值標(biāo)準(zhǔn)偏差的三倍。

LLOQ或化驗(yàn)靈敏度是可以準(zhǔn)確定量分析物的低濃度。在LLOQ進(jìn)行準(zhǔn)確定量的標(biāo)準(zhǔn)是分析物的回收率在75％至125％之間，變異系數(shù)（CV）小于25％。滿足這兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的骨膜素的低濃度被報(bào)告為LLOQ。

測定了人Periostin ELISA的以下值：

人骨膜素ELISA精密度

ELISA的準(zhǔn)確度定義為在一個(gè)操作員進(jìn)行的同一實(shí)驗(yàn)中（在運(yùn)行精密度或重復(fù)性范圍內(nèi)）和在使用相同樣品但由多個(gè)操作員進(jìn)行的使用不同ELISA批處理的多個(gè)實(shí)驗(yàn)中一致地測量相同濃度的能力。 （批間精度或重現(xiàn)性）。

批內(nèi)精度

一位操作員通過在一個(gè)人骨膜素ELISA批中五次測量兩個(gè)已知濃度的樣品，來評估批內(nèi)（批內(nèi)）精密度。

批間精度

通過多個(gè)操作員在多個(gè)人Periostin ELISA批次中測量兩個(gè)已知濃度的樣品十二次來評估運(yùn)行間（批間）的精密度。

人骨膜素ELISA準(zhǔn)確性

ELISA的準(zhǔn)確度定義為可以回收已知濃度樣品的準(zhǔn)確度。

通過向含有已知濃度內(nèi)源性Periostin的人樣品中添加重組Periostin來測量人Periostin ELISA的回收率。加標(biāo)濃度的回收率％計(jì)算為所測得的值與預(yù)期值的百分比。

下表顯示了人類Periostin ELISA在不同樣品基質(zhì)中的回收實(shí)驗(yàn)摘要：

+顯示個(gè)別測量

人骨膜素ELISA稀釋線性和平行度

稀釋線性和平行度的測試確保了含有Periostin的內(nèi)源和重組樣品均表現(xiàn)出劑量依賴性，并且不受基質(zhì)效應(yīng)的影響。稀釋線性評估了摻入已知濃度的重組分析物的稀釋人類樣品中的測量準(zhǔn)確性。相反，平行性是指人類樣品中的稀釋線性，并提供證據(jù)表明內(nèi)源性分析物的行為與重組物相同。對于稀釋度，評估每種樣品類型的線性和平行度，如果結(jié)果在預(yù)期濃度的20％以內(nèi)，則認(rèn)為線性和平行度可以接受。

稀釋線性

通過連續(xù)稀釋加標(biāo)有10000 pmol / l重組人Periostin的人類樣品來評估稀釋線性。

下表顯示了血清和檸檬酸鹽血漿中經(jīng)系列稀釋的重組人Periostin的平均回收率。參考值表示加標(biāo)前的樣品濃度。

平行性

通過用測定緩沖液連續(xù)稀釋含有內(nèi)源性骨膜素的人類樣品來評估平行性。

下表顯示了幾種人類樣品基質(zhì)中系列稀釋的內(nèi)源性骨膜素的平均回收率和范圍：

顯示個(gè)別測量

人骨膜素ELISA特異性

ELISA的特異性定義為其專門識(shí)別目標(biāo)分析物的能力。

人Periostin ELISA的特異性通過表位作圖和親和力測定來表征捕獲抗體和檢測抗體，從而顯示出特異性。此外，ELISA的特異性是通過競爭實(shí)驗(yàn)確定的，競爭實(shí)驗(yàn)可測量抗體特異性結(jié)合骨膜素的能力。

該測定法識(shí)別重組的和內(nèi)源的人骨膜素。

表位作圖

使用微陣列分析（Pepperprint GmbH）通過表位作圖確定抗體結(jié)合位點(diǎn)。

確定單克隆捕獲抗體結(jié)合Periostin（Q15063的AA542-549（Uniprot ID），亞型1）的FAS4結(jié)構(gòu)域中靠近N末端的線性表位。

多克隆檢測抗體識(shí)別分布在Periostin分子上的多個(gè)線性表位（Q15063的A113-121，AA125-132，AA244-250，AA694-701，AA764-771（Uniprot ID），同工型1）。

已經(jīng)發(fā)表了對此Periostin ELISA中使用的抗體識(shí)別的表位的定位的詳細(xì)描述：

夾心ELISA的特征，用于定量所有人類骨膜素同工型。
加德米爾（E.Gadermaier），特薩爾茲（Tesarz），蘇修（Suciu），AA-M。，沃維茲（Wallwitz），伯格（G.），希姆勒（Himmler），G。，2018 。實(shí)驗(yàn)室 肛門 32（2）。
PMID：28493527

顯示表位映射

信號競爭

通過將含有內(nèi)源Periostin的人類樣品與過量的捕獲抗體（AB）進(jìn)行預(yù)孵育來進(jìn)行競爭實(shí)驗(yàn)。然后將該混合物中測得的濃度與參考值進(jìn)行比較，該參考值是從相同樣品中進(jìn)行的，無需預(yù)孵育步驟。血清樣品的平均競爭率為98％。

顯示個(gè)別測量

亞型

優(yōu)化該測定法以檢測人骨膜素的所有已知同工型。

交叉反應(yīng)

由于人骨膜素和其他物種的骨膜素之間的序列同源性高，因此該分析中使用的抗體可能會(huì)與小鼠，大鼠，食蟹猴，狗和貓骨膜素發(fā)生交叉反應(yīng)。

樣品穩(wěn)定性

樣品制備

我們建議盡快通過離心分離血漿或血清，例如20分鐘，以2,000 xg，宜在4°C（2-8°C）下進(jìn)行。樣品可以在4°C（2-8°C）下保存過夜。要長期保存，請等分采集的血漿或血清樣品，并保存在-25°C或更低的溫度下。

凍融穩(wěn)定性

通過比較經(jīng)歷了四個(gè)凍融循環(huán)（F / T）的樣品中的骨膜素測量值，測試了內(nèi)源性骨膜素的穩(wěn)定性。四個(gè)凍融循環(huán)后樣品濃度的平均回收率為96％。

樣品可以經(jīng)歷四個(gè)凍融循環(huán)。

樣本值

顯然健康的供者的血清和血漿骨膜素值

為了提供循環(huán)Periostin的期望值，測試了一組看似健康的供體的樣品。

結(jié)果摘要如下所示：

我們建議為每個(gè)實(shí)驗(yàn)室確定正常范圍。

哮喘和心血管疾病組中的骨膜素值

除了看似健康的供體的樣本外，還測試了一組哮喘和心血管疾病隊(duì)列的樣本。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下所示。

*市售同類產(chǎn)品（Seralab）

矩陣比較

顯然健康個(gè)體的血清和血漿樣本的相關(guān)性

制備了14個(gè)看似健康個(gè)體的樣品，作為血清和血漿對，每個(gè)樣品均來自一個(gè)供體。分析樣品，并比較樣品的濃度。