bmgrp BI-20433說(shuō)明書

人骨膜素酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定| BI-20433

人骨膜素ELISA的亮點(diǎn)：

• 可檢測(cè)所有已知Periostin亞型的檢測(cè)
• 根據(jù)FDA / ICH / EMEA指南進(jìn)行了廣泛驗(yàn)證
• 包括7種基于人血清的標(biāo)準(zhǔn)品和2個(gè)對(duì)照

下一個(gè)

• 1個(gè)
• 2
• 3

分析特征

• 方法

  夾心ELISA，HRP / TMB，12×8孔可分離試紙

• 樣品類型

  血清，血漿（EDTA，檸檬酸鹽，肝素），尿液，細(xì)胞培養(yǎng)上清液

• 樣品量

  10 µl /孔

• 測(cè)定時(shí)間

  2小時(shí)/ 2小時(shí)/ 1小時(shí)/ 30分鐘

• 靈敏度

  20 pmol / l（= 1800 pg / ml）

• 標(biāo)準(zhǔn)范圍

  0 – 4,000 pmol / l（= 0 – 360 000 pg / ml）

• 轉(zhuǎn)換系數(shù)

  1 pmol / l = 91 pg / ml（分子量：91 kDa）

• 特異性

  內(nèi)源性和重組人骨膜素；所有已知的等位基因。

•  

  中間運(yùn)行（n = 10）：≤6％CV

  批量分析（n = 5）：≤3％CV

• 監(jiān)管狀況

  僅供研究使用。

• 交叉反應(yīng)

  由于人Periostin和其他物種的Periostin之間具有高度的序列同源性，因此與食蟹猴，狗和貓Periostin有潛在的交叉反應(yīng)性。

• 采用

  僅供研究使用。

• 驗(yàn)證數(shù)據(jù)

  請(qǐng)參閱驗(yàn)證數(shù)據(jù)選項(xiàng)卡，以了解：精度，準(zhǔn)確性，稀釋線性，健康供體的值等

產(chǎn)品詳情

• 產(chǎn)品總覽
• 分析原理

• 典型標(biāo)準(zhǔn)曲線
• 套件組件

人Periostin ELISA產(chǎn)品概述

人Periostin ELISA試劑盒是一個(gè)5.5小時(shí)的96孔三明治ELISA，用于定量測(cè)定人血清和血漿中的Periostin。骨膜素測(cè)定法采用基于人血清的標(biāo)準(zhǔn)品，以確保測(cè)量生物學(xué)上可靠的數(shù)據(jù)。

人Periostin試劑盒使用具有特征性結(jié)合動(dòng)力學(xué)的高度純化的，表位定位的抗體。

人骨膜素ELISA測(cè)定原理

Periostin ELISA試劑盒是一種夾心酶免疫測(cè)定法，用于定量測(cè)定人血清和血漿樣品中的Periostin。

下圖說(shuō)明了Periostin ELISA的原理：

捕獲抗體：小鼠抗人Periostin單克隆抗體
檢測(cè)抗體：多克隆山羊抗人Periostin抗體，生物素標(biāo)記
目標(biāo)抗原：人Periostin

一步，將預(yù)先稀釋的標(biāo)準(zhǔn)品/對(duì)照品/樣品和生物素化的多克隆山羊抗人Periostin抗體移液到微量滴定條的孔中，并用小鼠單克隆抗人Periostin抗體進(jìn)行預(yù)包被。標(biāo)準(zhǔn)/對(duì)照/樣品中存在的骨膜素與孔中的預(yù)包被抗體結(jié)合，并與檢測(cè)抗體形成三明治。在洗滌步驟中，去除所有非特異性未結(jié)合的材料。在第二步中，將結(jié)合物（抗生蛋白鏈菌素-HRP）移入孔中，并與檢測(cè)抗體反應(yīng)。在另一個(gè)洗滌步驟之后，將底物（TMB，四甲基聯(lián)苯胺）吸移到孔中。底物的酶催化顏色變化與樣品中存在的骨膜素量成正比。使用標(biāo)準(zhǔn)的微量滴定板讀數(shù)器可以檢測(cè)到這種顏色變化。使用從標(biāo)準(zhǔn)品獲得的值，生成吸光度（光密度，在450 nm處的OD）與標(biāo)準(zhǔn)濃度的劑量響應(yīng)曲線。直接從劑量反應(yīng)曲線確定樣品中人骨膜素的濃度。

人骨膜素ELISA典型標(biāo)準(zhǔn)曲線

下圖顯示了人骨膜素ELISA的典型標(biāo)準(zhǔn)曲線。免疫測(cè)定針對(duì)重組人Periostin肽進(jìn)行了校準(zhǔn)：

人Periostin ELISA試劑盒組件

儲(chǔ)存說(shuō)明： 人Periostin ELISA試劑盒中的所有試劑在4°C（2-8°C）下穩(wěn)定，直到每種試劑標(biāo)簽上注明的有效期。

使用說(shuō)明

• 樣品收集與儲(chǔ)存

• 試劑準(zhǔn)備

• 樣品制備

• 檢測(cè)方案

• 計(jì)算結(jié)果

樣品收集與儲(chǔ)存

血清，EDTA血漿，肝素血漿，檸檬酸鹽血漿，尿液和細(xì)胞培養(yǎng)上清液適用于此骨膜素測(cè)定。研究期間請(qǐng)勿更改樣品類型。我們建議對(duì)所有樣品，標(biāo)準(zhǔn)品和質(zhì)控品進(jìn)行重復(fù)測(cè)量。列出的樣品收集和儲(chǔ)存條件旨在作為一般準(zhǔn)則。

血清和血漿

使用EDTA，肝素或檸檬酸鹽作為抗凝劑，在標(biāo)準(zhǔn)化血清分離管（SST）或標(biāo)準(zhǔn)化血液采集管中收集靜脈血樣。對(duì)于血清樣品，讓樣品在室溫下凝結(jié)30分鐘。根據(jù)試管制造商的使用說(shuō)明離心分離。立即測(cè)定采集的樣品，或等分試樣并保存在-25°C或更低的溫度下。脂血或溶血的樣品可能會(huì)產(chǎn)生錯(cuò)誤的結(jié)果。樣品在四個(gè)凍融循環(huán)中保持穩(wěn)定。解凍后的樣品應(yīng)盡快測(cè)定。

尿

注意：根據(jù)FDA / ICH / EMEA指南進(jìn)行的用于測(cè)量尿液樣品中骨膜素的實(shí)驗(yàn)未經(jīng)過(guò)*驗(yàn)證。但是，我們的性能檢查表明可以使用此ELISA測(cè)定尿液樣品。

無(wú)菌收集當(dāng)天的一批尿（中游），直接排入無(wú)菌容器中。離心除去顆粒物，立即分析或等分并保存在-25°C或更低的溫度下。樣品解凍不要超過(guò)四次。解凍后的樣品應(yīng)盡快測(cè)定。

細(xì)胞培養(yǎng)上清液

注意：根據(jù)FDA / ICH / EMEA指南進(jìn)行的測(cè)量Periostin細(xì)胞培養(yǎng)上清液樣品的實(shí)驗(yàn)未經(jīng)過(guò)全面驗(yàn)證。但是，我們的性能檢查表明可以使用此ELISA測(cè)定細(xì)胞培養(yǎng)上清液樣品。 

通過(guò)離心去除顆粒，立即進(jìn)行分析或等分試樣，并將樣品存儲(chǔ)在
-25°C或更低的溫度下。樣品解凍不要超過(guò)四次。解凍后的樣品應(yīng)盡快測(cè)定。

試劑準(zhǔn)備

洗滌緩沖液

稀釋的WASHBUF在4°C（2-8°C）下可以穩(wěn)定長(zhǎng)達(dá)一個(gè)月。

標(biāo)準(zhǔn)與控制

重構(gòu)的STD和CTRL在-25°C或更低的溫度下穩(wěn)定，直到標(biāo)簽上標(biāo)明的失效日期為止。STD和CTRL可以經(jīng)歷一個(gè)凍融循環(huán)。

在測(cè)定之前，必須用ASYBUF（測(cè)定緩沖液）將STD / CTRLs稀釋1 + 50，例如10 µl STD / CTRL + 500 µl ASYBUF 。

注意：每孔需要150 µl預(yù)稀釋的STD / CTR1。

樣品制備

將樣品置于室溫并輕輕混合樣品，以確保樣品均勻。我們建議對(duì)所有樣品進(jìn)行重復(fù)測(cè)量。

測(cè)定前，血清和血漿樣品必須用ASYBUF（測(cè)定緩沖液）稀釋1 + 50，例如10 µl樣品+ 500 µl ASYBUF。OD仍超過(guò)標(biāo)準(zhǔn)范圍高點(diǎn)的1 + 50稀釋血清和血漿樣品可以用ASYBUF進(jìn)一步稀釋。

注意：每孔需要150 µl的預(yù)稀釋樣品。

使用未稀釋的尿液和細(xì)胞培養(yǎng)上清液樣品。OD超出標(biāo)準(zhǔn)范圍高點(diǎn)的尿液和細(xì)胞培養(yǎng)上清液樣品可用ASYBUF（測(cè)定緩沖液）稀釋1 + 50。

人骨膜素ELISA測(cè)定方案

在開(kāi)始測(cè)定之前，請(qǐng)閱讀整個(gè)方案。

計(jì)算結(jié)果

使用能夠生成四參數(shù)對(duì)數(shù)（4-PL）擬合的市售軟件從標(biāo)準(zhǔn)品的吸光度讀數(shù)構(gòu)建標(biāo)準(zhǔn)曲線。或者，將標(biāo)樣在x軸上的濃度相對(duì)于每種標(biāo)樣在y軸上的平均吸光度作圖，并通過(guò)圖中的點(diǎn)繪制佳擬合曲線。除4-PL以外的曲線擬合算法尚未得到驗(yàn)證，用戶需要對(duì)其進(jìn)行評(píng)估。

從標(biāo)準(zhǔn)曲線獲得樣品濃度。如果需要，可以通過(guò)應(yīng)用轉(zhuǎn)換因子（1 pg / ml = 0.011 pmol / l（MW：91 kDa））將pmol / l轉(zhuǎn)換為pg / ml。計(jì)算樣品的終濃度時(shí)，必須考慮1 + 50以上的樣品稀釋度。對(duì)于未稀釋的樣品，將值除以50，以獲得終樣品濃度。

套件隨附的質(zhì)量控制（QC）協(xié)議顯示了生產(chǎn)日期每個(gè)套件批次的終版本QC結(jié)果。客戶獲得的OD數(shù)據(jù)可能會(huì)受到各種影響，包括在整個(gè)保質(zhì)期內(nèi)信號(hào)強(qiáng)度正常下降的影響。但是，只要濃度高的標(biāo)準(zhǔn)品的OD為1.50或更高，并且CTRL的值在目標(biāo)范圍內(nèi)（參見(jiàn)標(biāo)簽），這就不會(huì)影響結(jié)果的有效性。

背景與治療領(lǐng)域

骨膜素蛋白

骨膜素（OSF-2）分泌為91 kDa的同型二聚體可溶性細(xì)胞外基質(zhì)蛋白，在富含膠原蛋白的纖維結(jié)締組織中表達(dá)。Periostin至少有7種亞型，是由其他剪接引起的（http://www.uniprot。。ｏｒｇ/uniprot/Q15063）。

骨膜素功能

骨膜素參與成骨細(xì)胞的募集，附著和擴(kuò)散。它與癌癥中的上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化以及在發(fā)展中的心臟中的間質(zhì)分化有關(guān)。骨膜素在骨科，組織修復(fù)，腫瘤科，心血管和呼吸系統(tǒng)疾病以及各種炎癥環(huán)境中具有功能。

• 代謝性疾病

  糖尿病性視網(wǎng)膜病（Ding等人，2018）

• 腎臟科

  腎臟纖維化（An等，2018; Hwang等，2017; Mael-Ainin等，2014; Sen等，2011）

  多囊腎（Raman等人，2018; Wallace等人，2014）

  高血壓腎病（Guerrot et al。，2012）

  腎臟損傷（Satirapoj等人，2015、2014、2012）

  IgA腎病（Hwang等，2016; Satirapoj等，2014）

• 腫瘤科

  多發(fā)性骨髓瘤（Terpos et al。，2016）

  成釉細(xì)胞瘤（Kang等人，2018）

  卵巢癌（Ryner等人，2015; Sung等人，2016; Tang等人，2018）

  甲狀腺乳頭狀癌（Giusca et al。，2017）

  頭頸癌（Liu et al。，2018）

  乳腺癌（Kim等，2017; Lambert等，2016; Nuzzo等，2016; Ratajczak-Wielgomas等，2017）

  肺癌（Che等，2017; Zhang等，2017）

  骨肉瘤（Hu et al。，2016）

  胃癌（Liu et al。，2016）

  膀胱癌（Silvers et al。，2016）

  前列腺癌（Tian等，2015）

• 骨科

  骨質(zhì)疏松癥（Kim等人，2015; Rousseau等人，2014; Varughese等人，2018; Yan等人，2017）

  佩吉特氏病（Polyzos et al。，2017）

  骨關(guān)節(jié)炎（Chijimatsu等，2015; Honsawek等，2015b; Rousseau等，2014; Tajika等，2017）

  類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（Kerschan-Schindl等，2018; Sakellariou等，2015）

  強(qiáng)直性脊柱炎（Solmaz u.a.，2018）

• 其他

  傷口愈合

  流產(chǎn)（Freis等人，2017）

  皮膚疾病（Murota等，2017; Sung等，2017）

  肝臟僵硬（Honsawek等，2015）

• 冠心病

  哮喘（Carpagnano等人，2018;Górska等人，2016; Hoshino等人，2016; Inoue等人，2016; Kim等人，2014; Lee等人，2018; Matsusaka等人，2015 ； O'Dwyer和Moore，2017； Song等，2015）

  過(guò)敏（富士島等人，2016;伊豆原等人，2017）

  肺纖維化（Ohta等，2017）

  支氣管肺發(fā)育不良（Ahlfeld et al。，2016）

文學(xué)

Periostin通過(guò)p38 MAPK途徑在急性腎臟損傷后誘導(dǎo)腎臟纖維化。
An，JN，Yang，SH，Kim，YC，Hwang，JH，Park，JY，Kim，DK，Kim，JH，Kim，DW，Hur，DG，Oh，YK，Lim，CS，Kim，YS，Lee， JP，2018年。上午。J.生理學(xué)。腎臟生理學(xué)。
PMID：30539653

尋找患有嚴(yán)重哮喘的氣管骨膜素：對(duì)2型內(nèi)異型聚類有用嗎？
Carpagnano，GE，Scioscia，G.，Lacedonia，D.，Soccio，P.，Lepore，G.，Saetta，M.，F(xiàn)oschino Barbaro，MP，Barnes，PJ，2018。胸部154，1083–1090。
PMID：30336944

血清骨膜素濃度升高與2型糖尿病患者的糖尿病性視網(wǎng)膜病變有關(guān)。
丁Y，葛強(qiáng)，曲海峰，馮Z.，龍杰。，魏強(qiáng)。，周Q.，吳，R.，姚L.，鄧H.， 2018.內(nèi)分泌 投資。41，937–945。
PMID：29349642

在成釉細(xì)胞瘤發(fā)病機(jī)理中Periostin表達(dá)上調(diào)。
Kang，Y.，Liu，J.，Zhang，Y.，Sun，Y.，Wang，J.，Huang，B.，Zhong，M.，2018.《病理科學(xué)》。Res。實(shí)踐 214，1959年-1965年。
PMID：30196986

類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎緩解：肌生長(zhǎng)抑制素降低，骨膜素血清水平升高。
Kerschan-Schindl，K.，Ebenbichler，G.，F(xiàn)öeger-Samwald，U.，Leiss，H.，Gesslbauer，C.，Herceg，M.，Stummvoll，G.，Marculescu，R.，Crevenna，R.，Pietschmann ，P.，2018年。維也納。克林 Wochenschr。
PMID：30171335

血清骨膜素水平：甲苯二異氰酸酯誘導(dǎo)的職業(yè)性哮喘的潛在血清學(xué)標(biāo)志物。
Lee，JH，Kim，SH，Choi，Y.，Trinh，HKT，Yang，EM，Ban，GY，Shin，YS，Ye，YM，Izuhara，K.，Park，HS，2018.延世醫(yī)學(xué)。J. 59，1214–1221。
PMID：30450856；PMCID：PMC6240562

骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞通過(guò)雷帕霉素介導(dǎo)的Periostin介導(dǎo)的磷酸肌醇3-激酶/ Akt /哺乳動(dòng)物靶標(biāo)促進(jìn)頭頸癌的進(jìn)展。
Liu，C.，F(xiàn)eng，X.，Wang，B.，Wang，X.，Wang，C.，Yu，M.，Cao，G.，Wang，H.，2018.癌癥科學(xué)。109，688–698。
PMID：29284199；PMCID：PMC5834805

收集管中的骨膜素過(guò)表達(dá)會(huì)加速多囊腎疾病中的腎囊腫生長(zhǎng)和纖維化。
拉曼，A.，帕內(nèi)爾，SC，張，Y.，Reif，GA，戴，Y.，卡納，A.，丹尼爾，E.，白色，C. J.生理學(xué)。腎臟生理學(xué)。
PMID：30332313

卵巢癌細(xì)胞與巨噬細(xì)胞通過(guò)骨膜素的相互干擾促進(jìn)了巨噬細(xì)胞的募集。
Tang M.，Liu，B.，Bu，X.，Zhao，P.，2018.癌癥科學(xué)。109，1309–1318。
PMID：29527764; PMCID：PMC5980394

小骨折，長(zhǎng)骨折和關(guān)節(jié)置換后的血清骨膜素水平：一項(xiàng)觀察性研究。
Varughese，R.，Semprini，R.，Munro，C.，F(xiàn)ingleton，J.，Holweg，C.，Weatherall，M.，Beasley，R.，Braithwaite，I.，2018.過(guò)敏性哮喘臨床。免疫 關(guān) J.可以 Soc。過(guò)敏臨床。免疫 14. 
PMID：30065761；PMCID：PMC6060508

慢病毒介導(dǎo)的Periostin沉默通過(guò)整聯(lián)蛋白信號(hào)通路對(duì)肺癌微環(huán)境和骨轉(zhuǎn)移的影響。
車潔。沉文治。鄧穎。戴.H。廖雅文。袁新利。張平.2017。科學(xué) 182，10-21。
PMID：28601389

流產(chǎn)婦女在懷孕初期的血清骨膜素水平顯著改變。
Freis，A.，Schlegel，J.，Kuon，RJ，Doster，A.，Jauckus，J.，Strowitzki，T.，Germeyer，A.，2017。生物學(xué) 內(nèi)分泌醇。RBE 15. 
PMID：29096644; PMCID：PMC5667517

乳頭狀甲狀腺癌在不同組織學(xué)變體中異質(zhì)骨膜素的表達(dá)。
Giusca，SE，Amalinei，C.，Lozneanu，L.，Ciobanu Apostol，D.，Andriescu，EC，Scripcariu，A.，Balan，R.，Avadanei，ER，C?runtu，I.-D.，2017. BioMed Res 。詮釋 2017，8701386. 
PMID：29435461; PMCID：PMC5757104

實(shí)驗(yàn)性抑制骨膜素可減輕腎臟纖維化。
Hwang，JH，Yang，SH，Kim，YC，Kim，JH，An，JN，Moon，KC，Oh，YK，Park，JY，Kim，DK，Kim，YS，Lim，CS，Lee，JP，2017。上午。J. Nephrol。46，501–517。
PMID：29268247

骨膜素在炎癥和過(guò)敏。
Izuhara，K.，Nunomura，S.，Nanri，Y.，Ogawa，M.，Ono，J.，Mitamura，Y.，Yoshihara，T.，2017年。細(xì)胞。大聲笑 生命科學(xué) CMLS 74，4293–4303。
PMID：28887633

上皮骨膜素表達(dá)與浸潤(rùn)性乳腺癌患者的不良生存相關(guān)。
Kim，G.-E.，Lee，JS，Park，MH，Yoon，JH，2017年。PloSOne 12，e0187635。
PMID：29161296；PMCID：PMC5697858

骨膜素在皮膚疾病的發(fā)病機(jī)理中。
Murota，H.，Lingli，Y.，片山，I.，2017.細(xì)胞。大聲笑 生命科學(xué) CMLS 74，4321–4328。
PMID：28916993

骨膜素在肺纖維化和氣道重塑中的作用。
O'Dwyer，DN，Moore，BB，2017年。Cell。大聲笑 生命科學(xué) CMLS 74，4305–4314。
PMID：28918442; PMCID：PMC5659879

單體骨膜素作為特發(fā)性肺纖維化的生物標(biāo)志物的有用性。
大田S.，岡本M.，藤本K.，坂本N.，高橋K.，山本H.，Ku島H.，石井H.，赤坂K.，小野J. A.Kamei，A.Azuma，Y.Matsumoto，H.Yamaguchi，Y.Aihara，M.，Johkoh，T.，Kawaguchi.A。，Ichiki，M.，Sagara，H.，Kadota，J.- I.，Hanaoka，M.，Hayashi，S.-I.，Kohno，S.，Hoshino，T.，Izuhara，K.，肺纖維化患者診斷開(kāi)發(fā)協(xié)會(huì)（CoDD-PF），2017年。 12，e0174547。
PMID：28355256；PMCID：PMC5371347

佩吉特氏病少年時(shí)期的骨膜素和硬化素水平。
Polyzos，SA，Makras，P.，Anastasilakis，AD，Mintziori，G.，Kita，M.，Papatheodorou，A.，Kokkoris，P.，Terpos，E.，2017。案例礦工。骨代謝。關(guān) J.Ital。Soc。骨質(zhì)疏松癥。礦工。代謝 ke。Dis。14，269-271。
PMID：29263750；PMCID：PMC5726226

骨膜素在乳腺癌細(xì)胞中的表達(dá)。
Ratajczak-Wielgomas，K.，Grzegrzolka，J.，Piotrowska，A.，Matkowski，R.，Wojnar，A.，Rys，J.，Ugorski，M.，Dziegiel，P.，2017。J.Oncol。51，1300–1310。
PMID：28902360

骨膜素水平與兒童特應(yīng)性皮炎的嚴(yán)重程度和長(zhǎng)期性相關(guān)。
Sung，M.，Lee，KS，Ha，EG，Lee，SJ，Kim，MA，Lee，SW，Jee，HM，Sheen，YH，Jung，YH，Han，MY，2017。兒童醫(yī)學(xué)。過(guò)敏免疫。關(guān) 出版 歐元。Soc。小兒科 過(guò)敏免疫。28，543–550。
PMID：28631851

骨膜素對(duì)膝骨關(guān)節(jié)炎滑膜細(xì)胞的影響。
Y. Tajika，Moue，T.，Ishikawa，S.，Asano，K.，Okumo，T.，Takagi，H.，Hisamitsu，T.，2017年。Vivo Athens Greece 31，69-77。
PMID：28064223; PMCID：PMC5354150

在中國(guó)老年婦女的髖部骨折早期，循環(huán)的骨膜素水平與骨密度損失和愈合進(jìn)展有關(guān)。
嚴(yán)潔。骨質(zhì)疏松癥。詮釋 J.Establ。結(jié)果合作社。歐元。找到了。骨質(zhì)疏松癥。Natl。骨質(zhì)疏松癥。找到了。美國(guó)28，2335–2341。
PMID：28382553

血清骨膜素對(duì)接受化療的晚期非小細(xì)胞肺癌患者的預(yù)測(cè)和預(yù)后價(jià)值。
Zhang，Y.，Yuan D.，Yao，Y.，Sun，W.，Shi，Y.，Su，X.，2017.腫瘤生物學(xué)。J. Soc。腫瘤發(fā)展生物學(xué)。中 39，1010428317698367. 
PMID：28459197

Ahlfeld，SK，Davis，SD，Kelley，KJ，Poindexter，BB，2016年。J.呼吸 暴擊 護(hù)理醫(yī)學(xué)。194，1430–1433。
PMID：27905846；PMCID：PMC5148145

測(cè)量眼淚骨膜素對(duì)眼部過(guò)敏性疾病的診斷和管理的有用性。
藤島H.，岡田N.，松本K.，深川K.，五十嵐A.，松田A.，小野J.，大田S.，穆凱H.，吉川M. Izuhara，K.，2016年。《過(guò)敏臨床》。免疫 138，459-467.e2。
PMID：26964692

哮喘和慢性阻塞性肺疾病患者不同呼吸樣品中骨膜素表達(dá)的比較研究。
Kórska，M.Maskey-Warz?chowska，Nejman-Gryz，P.Korczyński，P.Prochorec-Sobieszek，M.，Krenke，R.，2016 拱。中 編織。126，124–137。
PMID：26895432

初治類固醇的哮喘患者氣道壁厚度與血清骨膜素的關(guān)系。
Hoshino，M.，Ohtawa，J.，Akitsu，K.，2016。過(guò)敏性哮喘研究。37，225–230。
PMID：27178891

骨膜蛋白的高表達(dá)與腫瘤血管生成和骨肉瘤的不良預(yù)后密切相關(guān)。
Hu F，Shang，X.-F.，Wang，W.，Jiang，W.，F(xiàn)ang，C.，Tan，D.，Zhou，H.-C.，2016。J. Exp。Pathol。97、86–92。
PMID：27028305；PMCID：PMC4840243

尿液骨膜排泄可預(yù)測(cè)IgA腎病的腎臟結(jié)局。
Hwang，JH，Lee，JP，Kim，CT，Yang，SH，Kim，JH，An，JN，Moon，KC，Lee，H.，Oh，YK，Joo，KW，Kim，DK，Kim，YS，Lim ，CS，2016年。J. Nephrol。44，481–492。
PMID：27802442

骨膜素作為診斷小兒哮喘的生物標(biāo)志物。
井上（T.），明石（K.Akashi），渡邊（M.），池田（Y.），池田（Y.），沖繩（S.），本木（T.），鈴木（R.），薩加拉（S.），北河，柳田（N.），佐藤（S.）， Ebisawa，M.，Ohta，S.，Ono，J.，Izuhara，K.，Katsunuma，T.，2016年。Pediatr。過(guò)敏免疫。關(guān) 出版 歐元。Soc。小兒科 過(guò)敏免疫。27，521–526。
PMID：27062336

腫瘤細(xì)胞衍生的骨膜素調(diào)節(jié)維持乳腺癌干細(xì)胞的細(xì)胞因子。
Lambert，AW，Wong，CK，Ozturk，S.，Papageorgis，P.，Raghunathan，R.，Alekseyev，Y.，Gower，AC，Reinhard，BM，Abdolmaleky，HM，Thiagalingam，S.，2016。癌癥研究。MCR 14，103-113。
PMID：26507575；PMCID：PMC4715959

異丙腎上腺素誘導(dǎo)胃癌中骨膜素的表達(dá)。
劉國(guó)新，習(xí)慧卿，孫新耀，耿祖杰，楊世偉，陸耀杰，魏， B.，Chen L.，2016.延世醫(yī)學(xué)。J. 57，557–564。
PMID：26996552；PMCID：PMC4800342

基質(zhì)和上皮骨膜蛋白表達(dá)在人類乳腺癌中的預(yù)后價(jià)值：與臨床病理特征和死亡率結(jié)果相關(guān)。
Nuzzo，PV，Rubagotti，A.，Zinoli，L.，Salvi，S.，Boccardo，S.，Boccardo，F(xiàn).，2016。BMC癌癥
16，95。PMID：26872609; PMCID：PMC4752779

鑒定胞外囊泡性骨膜素是肌肉浸潤(rùn)性膀胱癌的特征。
Silvers，CR，Liu，Y.-R.，Wu，C.-H.，Miyamoto，H.，Messing，EM，Lee，Y.-F.，2016。Oncotarget7，23335–23345。
PMID：26981774；PMCID：PMC5029630

腫瘤微環(huán)境中的骨膜素與上皮性卵巢癌的不良預(yù)后和鉑耐藥相關(guān)。
Sung，P.-L.，Jan，Y.-H.，Lin，S.-C.，Huang，C.-C.，Lin，H.，Wen，K.-C.，Chao，K.- C.，Lai，C.-R.，Wang，P.-H.，Chuang-M。，Wu，H.-H.，Twu，N.-F.，Yen，M.-S. ，H.iao，M.，Huang，C.-YF，2016。Oncotarget7，4036-4047。
PMID：26716408; PMCID：PMC4826188

新診斷為癥狀性多發(fā)性骨髓瘤的患者，高水平的骨膜素與骨折率增加，MRI彌散性檢查，骨重塑異常和疾病進(jìn)展階段有關(guān)。
E. Terpos，D。Christoulas，E。Kastritis，Bagratuni，T.，Gavriatopoulou，M.，Roussou，M.，Papatheodorou，A.，Eleutherakis-Papaiakovou，E.，Kanellias，N.，Liakou，C ，Panagiotidis，I.，Migkou，M.，Kokkoris，P.，Moulopoulos，LA，Dimopoulos，MA，2016年。《血液癌癥雜志》 6，e482。
PMID：27716740; PMCID：PMC5098262

骨膜素在人骨關(guān)節(jié)炎軟骨中的表達(dá)及其病理作用。
R. Chijimatsu，R。Kunugiza，Y。，谷山，Y.，Nakamura，N。，富田，T。，吉川，H.，2015年。BMC肌肉骨骼。不和諧 16，215. 
PMID：26289167; PMCID：PMC4545863

血清骨膜素升高與肝臟僵硬和膽道閉鎖的臨床預(yù)后有關(guān)。
Honsawek，S.，Udomsinprasert，W.，Vejchapipat，P.，Chongsrisawat，V.，Phavichitr，N.，Poovorawan，Y.，2015a。生物標(biāo)記。生化。印度 世博會(huì)。反應(yīng)敏感性化學(xué)。20，157–161。
PMID：25980529

血漿和滑液骨膜素與影像學(xué)膝關(guān)節(jié)骨關(guān)節(jié)炎的關(guān)系：橫斷面研究。
Honsawek，S.，Wilairatana，V.，Udomsinprasert，W.，Sinlapavilawan，P.，Jirathanathornnukul，N.，2015b。Jt。骨頭脊椎牧師。82，352–355。
PMID：25881760

血漿骨膜素與絕經(jīng)后婦女的非椎骨骨折明顯相關(guān)，而與椎骨骨折無(wú)關(guān)：臨床證據(jù)表明，骨膜素對(duì)骨骼部位的影響不同。Kim，B.-J.，Rhee，Y.，Kim，CH，Baek，KH，Min，Y.-K.，Kim，D.-Y.，Ahn，SH，Kim，H.，Lee，SH， Lee，S.-Y.，Kang，M.-I.，Koh，J.-M.，2015年。骨81，435–441。
PMID：26297442

哮喘的表型與高血清骨膜素水平有關(guān)。
松阪（Matsusaka，M.），Ka田（Kabata），H。福永（K.Fukunaga），鈴木（Y.），正木（K。），K。 Sayama，K.，Koh，H.，Nakamura，M.，梅田，A.，Ono，J.，Ohta，S.，Izuhara，K.，Asano，K.，Betsuyaku，T.，2015。Allergol。詮釋 關(guān) J.Jpn。Soc。Allergol。64，175–180。
PMID：25838094

骨膜素和反應(yīng)性基質(zhì)的上調(diào)與原發(fā)化學(xué)耐藥性相關(guān)，并預(yù)測(cè)上皮性卵巢癌的臨床結(jié)果。
Ryner，L.，Guan，Y.，F(xiàn)irestein，R.，Xiao，Y.，Choi，Y.，Rabe，C.，Lu，S.，F(xiàn)uentes，E.，Huw，L.-Y.，Lackner， MR，F(xiàn)u，L.，Amler，LC，Bais，C.，Wang Y，2015.臨床。癌癥研究。關(guān) J.上午 副會(huì)長(zhǎng) 癌癥研究。21，2941–2951。
PMID：25838397

AS患者中的骨膜素循環(huán)水平：與臨床和影像學(xué)變量，炎癥標(biāo)志物和參與骨形成的分子有關(guān)。
Sakellariou，GT，Anastasilakis，AD，Bisbinas，I.，Oikonomou，D.，Gerou，S.，Polyzos，SA，Sayegh，F(xiàn)E，2015年。Oxf。Engl。54，908–914。
PMID：25349442

骨膜素是2型糖尿病腎損傷的組織和尿液生物標(biāo)志物。
B. Satirapoj，S。Tassanasorn，M。Charoenpitakchai，M.，Supasyndh，O.，2015年。PloSOne 10，e0124055。
PMID：25884625; PMCID：PMC4401767

哮喘兒童的血清骨膜素水平與氣道對(duì)甲乙膽堿和甘露醇的反應(yīng)過(guò)度有關(guān)。
Song，J.-S.，You，J.-S.，Jeong，S.-I.，Yang，S.，Hwang，I.-T.，Im，Y.-G.，Baek，H.- S.，Kim，H.-Y.，Suh，D.-I.，Lee，H.-B.，Izuhara，K.，2015年。過(guò)敏70，674-681。
PMID：25703927

基質(zhì)中骨膜素的過(guò)度表達(dá)與侵略性前列腺癌呈正相關(guān)。
田Y，崔春秋，李，QK，拉瑪帕納，F(xiàn)B，陳X.，金，SR，Veltri，R.，嘉，D.，張，Z.，默拉科拉，D.，張H. ，2015年。PloSOne 10，e0121502。
PMID：25781169; PMCID：PMC4362940

血清骨膜素與阿司匹林加重的呼吸系統(tǒng)疾病相關(guān)。
Kim，M.-A.，Izuhara，K.，Ohta，S.，Ono，J.，Yoon，MK，Ban，GY，Yoo，H.-S.，Shin，YS，Ye，Y.-M. ，Nahm，D.-H.，Park，H.-S.，2014年。過(guò)敏性哮喘免疫。關(guān) 出版 上午。Coll。過(guò)敏性哮喘免疫。113、314-320。
PMID：25037608

抑制骨膜蛋白表達(dá)可防止腎臟炎癥和纖維化的發(fā)展。
Mael-Ainin，M.，Abed，A.，Conway，SJ，Dussaule，J.-C.，Chatziantoniou，C.，2014。Soc。腎上腺素。25，1724-1736年。
PMID：24578131

血清骨膜素與絕經(jīng)后婦女的骨折風(fēng)險(xiǎn)相關(guān)：OFELY研究的7年前瞻性分析。
盧梭，JC，Sornay-Rendu，E.，Bertholon，C.，Chapurlat，R.，Ganero，P.，2014年。J。Clin。內(nèi)分泌醇。代謝 99，2533–2539。
PMID：24628551

尿骨膜素作為慢性同種異體移植腎病中腎損傷的生物標(biāo)志物。
Satirapoj，B.，Witoon，R.，Ruangkanchanasetr，P.，Wantanasiri，P.，Charoenpitakchai，M.，Choovichian，P.，2014。移植。進(jìn)程 46，135–140。

骨膜素可促進(jìn)多囊腎疾病中的腎囊腫生長(zhǎng)和間質(zhì)纖維化。
*，DP，白，C.，Savinkova，L.，Nivens，E.，Reif，GA，Pinto，CS，Raman，A.，Parnell，SC，Conway，SJ，F(xiàn)ields，TA，2014年。85，845–854。
PMID：24284511

確定骨膜素是高血壓腎病進(jìn)展/逆轉(zhuǎn)的關(guān)鍵標(biāo)志。
Guerrot，D.，Dussaule，J.-C.，Mael-Ainin，M.，Xu-Dubois，Y.-C.，Rondeau，E.，Chatziantoniou，C.，Placier，S.，2012。PloSOne 7 ，e31974。
PMID：22403621；PMCID：PMC3293874

骨膜素：進(jìn)行性腎損傷的新組織和尿液生物標(biāo)志物在腎小管細(xì)胞中誘導(dǎo)協(xié)調(diào)的間充質(zhì)表型。
Satirapoj，B.，Wang，Y.，Chamberlin，MP，Dai，T.，LaPage，J.，Phillips，L.，Nast，CC，Adler，SG，2012。撥號(hào)。移植。關(guān) 出版 歐元。撥號(hào)。運(yùn)輸 副會(huì)長(zhǎng) - 歐元。仁 副會(huì)長(zhǎng) 27，2702–2711。
PMID：22167593；PMCID：PMC3471549

骨膜素在腎小球損傷中被誘導(dǎo)并且在間質(zhì)性腎纖維化中從頭表達(dá)。
Sen，K.，Lindenmeyer，MT，Gaspert，A.，Eichinger，F(xiàn).，Neusser，MA，Kretzler，M.，Segerer，S.，Cohen，CD，2011。J.Pathol。179，1756–1767。
PMID：21854746

驗(yàn)證數(shù)據(jù)

• 校準(zhǔn)

• 檢測(cè)限和靈敏度

• 準(zhǔn)確性
• 稀釋線性度和平行度

• 特異性

• 交叉反應(yīng)

• 樣品穩(wěn)定性

• 樣本值

• 矩陣比較

所有Biomedica ELISA均根據(jù)FDA / ICH / EMEA指南進(jìn)行了驗(yàn)證。有關(guān)我們的驗(yàn)證準(zhǔn)則的更多信息，請(qǐng)參閱我們的質(zhì)量頁(yè)面以及已發(fā)布的驗(yàn)證準(zhǔn)則和文獻(xiàn)。

顯示驗(yàn)證文獻(xiàn)

校準(zhǔn)

針對(duì)重組人Periostin肽對(duì)人Periostin免疫測(cè)定進(jìn)行了校準(zhǔn)。

人骨膜素ELISA檢測(cè)下限和靈敏度

為了確定人Periostin ELISA的敏感性，進(jìn)行了測(cè)量檢測(cè)下限（LOD）和定量下限（LLOQ）的實(shí)驗(yàn)。

LOD（也稱為檢測(cè)極限）是可以在背景信號(hào)上方（即沒(méi)有Periostin的情況下測(cè)量的信號(hào)）高于99％的置信度的低點(diǎn)。將其定義為不含Periostin的樣品（三個(gè)獨(dú)立的測(cè)量值）的平均反向計(jì)算濃度加上測(cè)量值標(biāo)準(zhǔn)偏差的三倍。

LLOQ或化驗(yàn)靈敏度是可以準(zhǔn)確定量分析物的低濃度。在LLOQ進(jìn)行準(zhǔn)確定量的標(biāo)準(zhǔn)是分析物的回收率在75％至125％之間，變異系數(shù)（CV）小于25％。滿足這兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)的骨膜素的低濃度被報(bào)告為L(zhǎng)LOQ。

測(cè)定了人Periostin ELISA的以下值：

人骨膜素ELISA精密度

ELISA的準(zhǔn)確度定義為在一個(gè)操作員進(jìn)行的同一實(shí)驗(yàn)中（在運(yùn)行精密度或重復(fù)性范圍內(nèi)）和在使用相同樣品但由多個(gè)操作員進(jìn)行的使用不同ELISA批處理的多個(gè)實(shí)驗(yàn)中一致地測(cè)量相同濃度的能力。 （批間精度或重現(xiàn)性）。

批內(nèi)精度

一位操作員通過(guò)在一個(gè)人骨膜素ELISA批中五次測(cè)量?jī)蓚€(gè)已知濃度的樣品，來(lái)評(píng)估批內(nèi)（批內(nèi)）精密度。

批間精度

通過(guò)多個(gè)操作員在多個(gè)人Periostin ELISA批次中測(cè)量?jī)蓚€(gè)已知濃度的樣品十二次來(lái)評(píng)估運(yùn)行間（批間）的精密度。

人骨膜素ELISA準(zhǔn)確性

ELISA的準(zhǔn)確度定義為可以回收已知濃度樣品的準(zhǔn)確度。

通過(guò)向含有已知濃度內(nèi)源性Periostin的人樣品中添加重組Periostin來(lái)測(cè)量人Periostin ELISA的回收率。加標(biāo)濃度的回收率％計(jì)算為所測(cè)得的值與預(yù)期值的百分比。

下表顯示了人類Periostin ELISA在不同樣品基質(zhì)中的回收實(shí)驗(yàn)摘要：

+顯示個(gè)別測(cè)量

人骨膜素ELISA稀釋線性和平行度

稀釋線性和平行度的測(cè)試確保了含有Periostin的內(nèi)源和重組樣品均表現(xiàn)出劑量依賴性，并且不受基質(zhì)效應(yīng)的影響。稀釋線性評(píng)估了摻入已知濃度的重組分析物的稀釋人類樣品中的測(cè)量準(zhǔn)確性。相反，平行性是指人類樣品中的稀釋線性，并提供證據(jù)表明內(nèi)源性分析物的行為與重組物相同。對(duì)于稀釋度，評(píng)估每種樣品類型的線性和平行度，如果結(jié)果在預(yù)期濃度的20％以內(nèi)，則認(rèn)為線性和平行度可以接受。

稀釋線性

通過(guò)連續(xù)稀釋加標(biāo)有10000 pmol / l重組人Periostin的人類樣品來(lái)評(píng)估稀釋線性。

下表顯示了血清和檸檬酸鹽血漿中經(jīng)系列稀釋的重組人Periostin的平均回收率。參考值表示加標(biāo)前的樣品濃度。

平行性

通過(guò)用測(cè)定緩沖液連續(xù)稀釋含有內(nèi)源性骨膜素的人類樣品來(lái)評(píng)估平行性。

下表顯示了幾種人類樣品基質(zhì)中系列稀釋的內(nèi)源性骨膜素的平均回收率和范圍：

顯示個(gè)別測(cè)量

人骨膜素ELISA特異性

ELISA的特異性定義為其專門識(shí)別目標(biāo)分析物的能力。

人Periostin ELISA的特異性通過(guò)表位作圖和親和力測(cè)定來(lái)表征捕獲抗體和檢測(cè)抗體，從而顯示出特異性。此外，ELISA的特異性是通過(guò)競(jìng)爭(zhēng)實(shí)驗(yàn)確定的，競(jìng)爭(zhēng)實(shí)驗(yàn)可測(cè)量抗體特異性結(jié)合骨膜素的能力。

該測(cè)定法識(shí)別重組的和內(nèi)源的人骨膜素。

表位作圖

使用微陣列分析（Pepperprint GmbH）通過(guò)表位作圖確定抗體結(jié)合位點(diǎn)。

確定單克隆捕獲抗體結(jié)合Periostin（Q15063的AA542-549（Uniprot ID），亞型1）的FAS4結(jié)構(gòu)域中靠近N末端的線性表位。

多克隆檢測(cè)抗體識(shí)別分布在Periostin分子上的多個(gè)線性表位（Q15063的A113-121，AA125-132，AA244-250，AA694-701，AA764-771（Uniprot ID），同工型1）。

已經(jīng)發(fā)表了對(duì)此Periostin ELISA中使用的抗體識(shí)別的表位的定位的詳細(xì)描述：

夾心ELISA的特征，用于定量所有人類骨膜素同工型。
加德米爾（E.Gadermaier），特薩爾茲（Tesarz），蘇修（Suciu），AA-M。，沃維茲（Wallwitz），伯格（G.），希姆勒（Himmler），G。，2018 。實(shí)驗(yàn)室 肛門 32（2）。
PMID：28493527

顯示表位映射

信號(hào)競(jìng)爭(zhēng)

通過(guò)將含有內(nèi)源Periostin的人類樣品與過(guò)量的捕獲抗體（AB）進(jìn)行預(yù)孵育來(lái)進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)實(shí)驗(yàn)。然后將該混合物中測(cè)得的濃度與參考值進(jìn)行比較，該參考值是從相同樣品中進(jìn)行的，無(wú)需預(yù)孵育步驟。血清樣品的平均競(jìng)爭(zhēng)率為98％。

顯示個(gè)別測(cè)量

亞型

優(yōu)化該測(cè)定法以檢測(cè)人骨膜素的所有已知同工型。

交叉反應(yīng)

由于人骨膜素和其他物種的骨膜素之間的序列同源性高，因此該分析中使用的抗體可能會(huì)與小鼠，大鼠，食蟹猴，狗和貓骨膜素發(fā)生交叉反應(yīng)。

樣品穩(wěn)定性

樣品制備

我們建議盡快通過(guò)離心分離血漿或血清，例如20分鐘，以2,000 xg，宜在4°C（2-8°C）下進(jìn)行。樣品可以在4°C（2-8°C）下保存過(guò)夜。要長(zhǎng)期保存，請(qǐng)等分采集的血漿或血清樣品，并保存在-25°C或更低的溫度下。

凍融穩(wěn)定性

通過(guò)比較經(jīng)歷了四個(gè)凍融循環(huán)（F / T）的樣品中的骨膜素測(cè)量值，測(cè)試了內(nèi)源性骨膜素的穩(wěn)定性。四個(gè)凍融循環(huán)后樣品濃度的平均回收率為96％。

樣品可以經(jīng)歷四個(gè)凍融循環(huán)。

樣本值

顯然健康的供者的血清和血漿骨膜素值

為了提供循環(huán)Periostin的期望值，測(cè)試了一組看似健康的供體的樣品。

結(jié)果摘要如下所示：

我們建議為每個(gè)實(shí)驗(yàn)室確定正常范圍。

哮喘和心血管疾病組中的骨膜素值

除了看似健康的供體的樣本外，還測(cè)試了一組哮喘和心血管疾病隊(duì)列的樣本。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下所示。

*市售同類產(chǎn)品（Seralab）

矩陣比較

顯然健康個(gè)體的血清和血漿樣本的相關(guān)性

制備了14個(gè)看似健康個(gè)體的樣品，作為血清和血漿對(duì)，每個(gè)樣品均來(lái)自一個(gè)供體。分析樣品，并比較樣品的濃度。